美國(guó)華盛頓大學(xué)團(tuán)隊(duì)使用eDNA及PCR技術(shù)尋找保護(hù)動(dòng)物斑鱉

稀有物種保護(hù)：

通過(guò)水體中的環(huán)境DNA可以有效檢測(cè)水生脊椎動(dòng)物，并且已在濕地和大型河流研究中得到證實(shí)^[26]。利用環(huán)境DNA檢測(cè)河流中的稀有物種和隱秘物種可以增加調(diào)查結(jié)果準(zhǔn)確性，減少調(diào)查成本。Goldberg等^[8]利用metabarcoding技術(shù)，通過(guò)收集快速流動(dòng)的水體環(huán)境DNA樣本，對(duì)尾突角蟾(Ascaphus montanus)和愛(ài)達(dá)荷陸巨螈(Dicamptodon aterrimus)兩種物種進(jìn)行監(jiān)測(cè)。設(shè)計(jì)特異性引物尾突角蟾和愛(ài)達(dá)荷陸巨螈的線粒體Cyt b區(qū)域的85bp和78bp片段，在5個(gè)不同物種密度的水樣中均成功進(jìn)行了PCR擴(kuò)增并靈敏地檢測(cè)到了目標(biāo)物種的存在。該研究還發(fā)現(xiàn)早春季節(jié)比早秋季節(jié)更難以檢測(cè)到兩棲類物種存在，推測(cè)可能是由于早春比早秋溫度更低，降低了生物代謝速率而導(dǎo)致。Foote等^[28]從海水中分離DNA，使用特異性引物擴(kuò)增線粒體DNA區(qū)域60—80bp的片段檢測(cè)水體中是否存在港灣鼠海豚(Phocoena phocoena)，對(duì)控制條件下和自然條件下該物種進(jìn)行遺傳監(jiān)測(cè)。在一個(gè)樣地中檢測(cè)到長(zhǎng)肢領(lǐng)航鯨(Globicephala melas)，而該物種極少在研究海域被發(fā)現(xiàn)，結(jié)果表明環(huán)境DNA的方法可用于檢測(cè)稀有物種。Wilcox等^[27]利用環(huán)境DNA結(jié)合定量PCR檢測(cè)了河流中的兩個(gè)稀有物種，美洲紅點(diǎn)鮭(Salvelinus fontinalis)和強(qiáng)壯紅點(diǎn)鮭(S.confluentus)，同時(shí)發(fā)現(xiàn)定量PCR(qPCR)比傳統(tǒng)PCR更加靈敏，檢測(cè)概率更高。Rees等^[25]利用環(huán)境DNA和傳統(tǒng)的實(shí)地調(diào)查方法開(kāi)展對(duì)英國(guó)保護(hù)物種冠北螈(Triturus cristatus)的監(jiān)測(cè)，野外調(diào)查發(fā)現(xiàn)有冠北螈分布的地點(diǎn)中，采集的水樣DNA中成功檢測(cè)出冠北螈的概率為84%。使用環(huán)境DNA方法監(jiān)測(cè)物種，對(duì)物種及其生存環(huán)境不會(huì)造成損害。隨著測(cè)序成本的下降，環(huán)境DNA與metabarcoding技術(shù)結(jié)合應(yīng)用在許多情況下甚至優(yōu)于一些傳統(tǒng)監(jiān)測(cè)方法，成為物種監(jiān)測(cè)方法的又一選擇^[4]。

對(duì)視頻中相關(guān)設(shè)備感興趣—eDNA采樣器及現(xiàn)場(chǎng)熒光定量PCR儀 可與我公司聯(lián)系。